人Y染色体(SRY)探针法荧光定量PCR试剂盒本产品是根据 PCR 原理开发,它具有下列特点:
1. 即开即用,用户只需要提供 DNA 模板。
2. 引物经过精心优化,专一性强,只扩增 SRY 基因。
3. 提供阳性对照,便于区分假阴性样品。
4. PCR mix 中含上样染料,PCR 后可以直接上样电泳。
本试剂盒足够做 40μL 体系的 PCR 50 次,但只能用于科研。
使用方法:
一、样品 DNA 的制备
1. 用自选方法纯化 N+2 个样品的 DNA,本试剂盒跟市场上大多数核酸提取试剂盒兼容。
2. 如果有 N 个样品,则需要做 N+2 个提取,包括一个样品制备阳性对照和一个样品制备阴性对照。样品制备阳性对照是在适量水(取决于试剂盒要求的样品起始量)中加 10μL 人 Y 染色体性别决定区(SRY)PCR 阳性对照的 100 倍稀释液而得,样品制备阴性对照是直接用水。提取结束后 得到模板 DNA 放冰上待用。
二、设置PCR 反应(40μL 体系)
对 N+2 个样品,在PCR 时需要增加一个 PCR 阳性对照和一个 PCR 阴性对照,故需要设置 N+4 个反应。在 N+4 个PCR 管中分别加入下列成分:
人Y染色体性别决定区(SRY)PCR试剂盒
实验操作
1.模板制备(样本制备区)
建议使用配套水生动物病毒基因组DNA/RNA提取试剂盒系列产品,具体过程详见产品说明书。
2.添加模板(模板添加区,放置于冰盒上进行)
剪下所需测试数的已含有反应液的PCR管,放置在室温待解冻后,离心30秒后揭开封口膜,向每管反应液中分别加入5μL模板,顺序为NG、待测样品模板、PG-VH-P。盖好配套的PCR管盖后,涡旋混匀30s,离心1min,立即进行PCR扩增反应。
3. 扩增反应(扩增及产物分析区)
使用荧光定量PCR仪,荧光基团选择FAM,淬灭基团选择TAMRA。