产品名称:气肿疽梭菌(CC)检测试剂盒(PCR-荧光探针法)
检测方法: 实时荧光 PCR
规 格: 50T
保存方式: 2~8℃
有 效 期: 1年
产 地: 中国
用 途: 仅用于科研实验
订购流程气肿疽梭菌(CC)检测试剂盒(PCR-荧光探针法)
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ELISA常见问题:气肿疽梭菌(CC)检测试剂盒(PCR-荧光探针法)
利用ELISA进行检验常见的样本一般包括血液(指血,静脉血),尿,粪便,脑脊液,胸腹水,前列腺液,精液,阴道分泌物等,这些样本收集的时间、方法和保存都有一定的要求。
1、抗原:ELISA抗原有三类:液体中纯化的自然抗原、合成抗原和基因重组抗原。
纯度不高可导致试剂盒的特异性不强,合成抗原一般都是多肽抗原,
试剂盒一般为基因重组抗原。抗原纯度不高,特异性就不强,
2、抗体特异性和亲和力的大小会影响试剂盒的特异性和敏感性
3、酶结合物,试剂盒的保存时间通常由酶的稳定性决定。
最常用的就是辣根过氧化酶-HRP.其他还有碱性磷酸酶和β半乳糖苷酶。
ELISA温浴和洗涤一般为磷酸盐缓冲液(PBS)
碱性磷酸酶的话就不能用PBS洗涤了,因为残留的PBS会抑制一半的酶活性。
TMB显色液取代了OPD为HRP最常用的色原底物。为氧化还原反应(OPD对机体有突变作用,所以改用TMB)
气肿疽梭菌(CC)检测试剂盒(PCR-荧光探针法)
【检验方法的局限性】
1. 当检测样本中被检核酸浓度低于本试剂盒的*检出限时可能会发生假阴性的结果。
2. 被检样本在采集、运输、储存以及处理过程中操作方式不当容易造成RNA降解而产生假阴性结果。
3. 样本在采集、运输、储存以及处理过程中发生交叉污染,则容易得到假阳性结果。
【产品性能指标】 产品的*检出限为102 Copies/mL,产品CV值≤5%。
气肿疽梭菌(CC)检测试剂盒(PCR-荧光探针法)
【注意事项】
所有操作严格按照说明书进行;
试剂盒内各种组分使用前应自然融化,混匀并短暂离心;
反应液应避光保存;
反应中尽量避免气泡存在,管盖需盖紧;
使用一次性吸头、一次性手套和各区专用工作服;
样本处理、试剂配制、加样需在不同区进行,以免交叉污染;
实验完毕后用10%次氯酸或75%酒精或紫外灯处理工作台和移液器;
试剂盒里所有物品应视为污染物对待,并按照《微生物生物医学实验室生物安全通则》进行处理。.
实验操作
1.模板制备(样本制备区)
建议使用配套水生动物病毒基因组DNA/RNA提取试剂盒系列产品,具体过程详见产品说明书。
2.添加模板(模板添加区,放置于冰盒上进行)
剪下所需测试数的已含有反应液的PCR管,放置在室温待解冻后,离心30秒后揭开封口膜,向每管反应液中分别加入5μL模板,顺序为NG、待测样品模板、PG-VH-P。盖好配套的PCR管盖后,涡旋混匀30s,离心1min,立即进行PCR扩增反应。
3. 扩增反应(扩增及产物分析区)
使用荧光定量PCR仪,荧光基团选择FAM,淬灭基团选择TAMRA。
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