产品名称：禽流感病毒H5N1亚型(IAV-H5N1)检测试剂盒(RRT-PCR法）

检测方法： 实时荧光 PCR

规    格： 50T

保存方式： 2~8℃

有 效 期： 1年

产    地： 中国

用    途： 仅用于科研实验

订购流程:禽流感病毒H5N1亚型(IAV-H5N1)检测试剂盒(RRT-PCR法）

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ELISA常见问题：禽流感病毒H5N1亚型(IAV-H5N1)检测试剂盒(RRT-PCR法）

利用ELISA进行检验常见的样本一般包括血液（指血，静脉血），尿，粪便，脑脊液，胸腹水，前列腺液，精液，阴道分泌物等，这些样本收集的时间、方法和保存都有一定的要求。

1、抗原：ELISA抗原有三类：液体中纯化的自然抗原、合成抗原和基因重组抗原。

纯度不高可导致试剂盒的特异性不强，合成抗原一般都是多肽抗原，

试剂盒一般为基因重组抗原。抗原纯度不高，特异性就不强，

2、抗体特异性和亲和力的大小会影响试剂盒的特异性和敏感性

3、酶结合物，试剂盒的保存时间通常由酶的稳定性决定。

最常用的就是辣根过氧化酶-HRP.其他还有碱性磷酸酶和β半乳糖苷酶。

ELISA温浴和洗涤一般为磷酸盐缓冲液（PBS）

碱性磷酸酶的话就不能用PBS洗涤了，因为残留的PBS会抑制一半的酶活性。

TMB显色液取代了OPD为HRP最常用的色原底物。为氧化还原反应（OPD对机体有突变作用，所以改用TMB）

禽流感病毒H5N1亚型(IAV-H5N1)检测试剂盒(RRT-PCR法）

【检验方法的局限性】

1. 当检测样本中被检核酸浓度低于本试剂盒的*检出限时可能会发生假阴性的结果。

2. 被检样本在采集、运输、储存以及处理过程中操作方式不当容易造成RNA降解而产生假阴性结果。

3. 样本在采集、运输、储存以及处理过程中发生交叉污染，则容易得到假阳性结果。

【产品性能指标】 产品的*检出限为10² Copies/mL，产品CV值≤5%。

【注意事项】

所有操作严格按照说明书进行；
试剂盒内各种组分使用前应自然融化，混匀并短暂离心；
反应液应避光保存；
反应中尽量避免气泡存在，管盖需盖紧；
使用一次性吸头、一次性手套和各区专用工作服；
样本处理、试剂配制、加样需在不同区进行，以免交叉污染；
实验完毕后用10%次氯酸或75%酒精或紫外灯处理工作台和移液器；
试剂盒里所有物品应视为污染物对待，并按照《微生物生物医学实验室生物安全通则》进行处理。.

实验操作

1.模板制备（样本制备区）
建议使用配套水生动物病毒基因组DNA/RNA提取试剂盒系列产品，具体过程详见产品说明书。
2.添加模板（模板添加区，放置于冰盒上进行）
剪下所需测试数的已含有反应液的PCR管，放置在室温待解冻后，离心30秒后揭开封口膜，向每管反应液中分别加入5μL模板，顺序为NG、待测样品模板、PG-VH-P。盖好配套的PCR管盖后，涡旋混匀30s，离心1min，立即进行PCR扩增反应。
3. 扩增反应（扩增及产物分析区）
使用荧光定量PCR仪，荧光基团选择FAM，淬灭基团选择TAMRA。

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