羊布氏杆菌(BS)核酸检测试剂盒(PCR法)
操作步骤
1 病毒 RNA 的提取
1.1 取已处理的样品、阴性对照和阳性对照,分别加入裂解液 600 μL,充分颠倒混匀,室温静置 3~
5 min。
1.2 将液体吸入吸附柱中(吸附柱要套上收集管,吸取液体时尽量不要吸到悬浮杂质,以免离心时 堵塞吸附柱),13000 rpm 离心 30 s。
1.3 弃去收集管中液体,加入 600 μL 洗液,13000 rpm 离心 30 s。
1.4 重复步骤 1.3。
1.5 弃去收集管中液体,13000 rpm 空柱离心 2 min,以除去残留的洗涤液。
1.6 将吸附柱移入新的 1.5 mL 离心管中,向柱中央加入洗脱液 50 μL,室温静置 1 min,13000 rpm
离心 30 s,离心管中液体即为模板 RNA。
◆ 注意事项
1.本试剂检测灵敏度高。为了防止污染,实验要分区操作。
1)第一区:样本制备区。
2)第二区:模板添加区。
3)第三区:扩增及产物分析区。
★ 分区之间*进行物理性隔离,避免人为因素造成的污染。
2.实验过程中穿戴工作服和乳胶手套,不同区域独立使用工具,需更换手套和实验服。
3.严格按照操作步骤操作,试剂配制和加样等步骤请严格按照说明书要求在冰盒上操作。
4.反应液中的成分对光敏感,应避光保存。试剂使用前要完全解冻,但应避免反复冻融,推荐使用前离心30秒,并按检测频次将反应液以适当体积分管保存。
5.反应结束后,扩增管请置于密封袋内丢弃,当日清理,开盖易造成气溶胶污染,禁止开盖。
6.不同批号试剂请勿混合使用,在有效期内使用。