土壤纤维素酶试剂盒详细介绍

名    称：土壤纤维素酶试剂盒

标记物：HRP

检测方法：酶联免疫法

检测波长：450nm

规    格：96孔/48孔

保 质 期：6个月
保存温度：2-8℃

所需样本体积：50-100ul

产    地：国产(上海)/进口(美国)

适用范围：仅供科研，不得用于其他用途，禁止用于临床

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土壤纤维素酶试剂盒组成

自备物品：

1.      酶标仪（450nm)

2.      高精度加样器及枪头

3.      37℃恒温箱

操作步骤

1. 标准品的稀释：本试剂盒提供原倍标准品一支，用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。

12U/L 5号标准品 150μl的原倍标准品加入150μl标准品稀释液

6U/L 4号标准品 150μl的5号标准品加入150μl标准品稀释液

3 U/L 3号标准品 150μl的4号标准品加入150μl标准品稀释液

1.5 U/L 2号标准品 150μl的3号标准品加入150μl标准品稀释液

0.75 U/L 1号标准品 150μl的2号标准品加入150μl标准品稀释液  

2. 加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl，待测样品孔中先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品10μl（样品最终稀释度为5倍）。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。

3. 温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟。   

4. 配液：将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用

5. 洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此重复5次，拍干。

6. 加酶：每孔加入酶标试剂50μl，空白孔除外。

7. 温育：操作同3。

8. 洗涤：操作同5。

9. 显色：每孔先加入显色剂A50μl，再加入显色剂B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色15分钟.

10. 终止：每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。

11. 测定：以空白空调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度（OD值）。 测定应在加终止液后15分钟以内进行。