英文名称：Vulpes derived  ingredients Detection Kit(Real-Time PCR Method)
包装：50T

【预期用途】动物源性成分广泛分布于食品、饲料、化妆品等，与人们的生活息息相关，其中食品和饲料所占的比例*。肉及肉制品掺假成为世界各国共同关注的热点问题，肉食品及其饲料的安全隐患直接关系到人类的安危。近几十年来，以 PCR 技术为核心的动物源性成分检测获得了广泛应用

本试剂盒适用于动物组织以及食品、饲料等样本中狐狸源性成分的检测。

【检验原理】

本试剂盒采用TaqMan探针法实时荧光PCR技术，设计一对狐狸源性成分基因保守区特异性引物结合一条特异性探针，用荧光PCR技术对狐狸源性成分基因保守区的DNA进行体  外扩增检测，从而达到快速检测之目的。

狐狸源性成分（Vulpes）试剂盒(荧光-PCR法)PCR扩增时在加入一对引物的同时加入一个特异性的荧光探针，该探针为一寡核苷酸，两端分别标记一个报告荧光基团和一个淬灭荧光基团。探针完整时，报告基团发射的荧光信号被淬灭基团吸收；刚开始时, 探针结合在DNA任意一条单链上;PCR扩增时，Taq酶的5’端－3’端外切酶活性将探针酶切降解，使报告荧光基团和淬灭荧光基团分离，从而荧光监测系统可接收到荧光信号，即每扩增一条DNA链，就有一个荧光分子形成，实现了荧光信号的累积与PCR产物形成完全同步。

狐狸源性成分（Vulpes）试剂盒(荧光-PCR法)在PCR 管中加入下列成分：

狐狸源性成分（Vulpes）试剂盒(荧光-PCR法)操作步骤

取动物组织及其制品、食品或饲料约 1g，手术剪剪碎混匀后取 0.5g 于研磨器中研磨，加入 1.5mL 生理盐水后继续研磨，待匀浆后转至 1.5mL 灭菌离心管中， 8000rpm 离心 2min，取上清液 100μL 于 1.5mL 灭菌离心管中。

DNA 提取

样本 DNA 的提取采用 DNA 提取试剂盒（离心柱提取法），请严格按照试剂盒说明书进行操作。试剂配制（试剂准备区）根据待检测样本总数，设所需要的 PCR 反应管管数为 N(N=样本数+1 管阴性对照+1 管阳性对照；样品每满 10 份，多配制 1 份)，每测试反应体系配制如下表：

PCR 扩增（核酸扩增区）

4.1 将待检测反应管置于荧光定量 PCR 仪反应槽内；

4.2 设置好通道、样品信息，反应体系设置为 25ul；荧光通道选择： 检测通道

（Reporter Dye）FAM， 淬灭通道（Quencher Dye）NONE，请勿选择 ROX 参比荧光。

4.3 推荐循环参数设置：

现整体倾斜时，根据分析后图像调节 Baseline 的 start 值(一般可在 3~15 范围内调节)、stop 值(一般可在 5~20 范围内调节)，以及 Threshold 的 Value 值(上下拖动阈值线至高于阴性对照)，重新分析结果。

判断a) 检测通道 Ct 值≤30，有 FAM 荧光信号检出，并出现典型的扩增曲线，判断样品为阳性。

b) 当 30值≤35 时，且有典型的扩增曲线时，则需重复实验。再次扩增后检测体系的Ct 值仍≤35，且有典型的扩增曲线，则判定该样品含有相应的动物源性成分。当再次扩增后，检测体系 Ct 值＞35，或无典型的扩增曲线，则判定该样品不含相应的动物源性成分。

质控标准

a) 空白对照：无FAM 荧光信号检出或 Ct 值≥35，未出现典型的扩增曲线。

b) 阴性对照：无FAM 荧光信号检出或 Ct 值≥35，未出现典型的扩增曲线。

c) 阳性对照：有 FAM 荧光信号检出，并出现典型的扩增曲线，Ct 值＜30。

d) 以上应同时满足，否则本次实验无效。

PCR反应液请在冰中配制，然后置于PCR反应仪上进行PCR反应。这种冷启动法（Cool Start Method）与热启动法（Hot Start Method）相结合，更能有效地减少PCR过程中的非特异性反应，增强PCR扩增的特异性，能得到良好的PCR结果。

PCR的反应条件：

因扩增片段的大小、反应体积、使用扩增仪器的不同而不同。

◇ 循环次数

根据模板DNA的量以及扩增片段的大小，设定25～30个循环。

如果循环次数太少，扩增量不足；如果循环次数太多，则会出现Smear。

狐狸源性成分（Vulpes）试剂盒(荧光-PCR法)特点

1，严格的质控体系：所有试剂盒从原料到成品经过严格的质控，确保试剂盒质量及稳定性

2，产品不断优化，很好的灵敏度；

3，综合指标特性，研发便捷操作的试剂盒；

4，检测验证样本多样；

5，专业的研发团队为客户提供个性化的定*务；

6，提供食品安全药物残留Elisa试剂盒，以及快检试剂盒

7，完善专业的售前售后服务

库存均有现货。

4.产品订购以订货当日*价格为准。

5.所有产品为确保质量，出库均复检。 Wnt1抗体,信号通路Wnt1抗体 Anti-GLUR3/GRIA 3 PEG3蛋白抗体 小鼠碳酸酐酶2(CA-2)ELISA试剂盒 胰岛素样生长因子结合蛋白-4抗体 人羟脯氨酸(Hyp)ELISA试剂盒 人碱性胎儿蛋白(BFP)ELISA试剂盒 小鼠免疫球蛋白M(IgM)ELISA试剂盒 蛋白裂解酶（一种新的癌基因）抗体 兔子肠脂肪酸结合蛋白(iFABP)ELISA试剂盒 性激素结合球蛋白抗体 大鼠血小板膜糖蛋白ⅡbⅢa(GP-ⅡbⅢa/CD41+CD61)ELISA试剂盒 人γ干扰素诱导蛋白16/p16(IFI16/p16)ELISA试剂盒 Anti-Nrf2 Wnt1抗体,信号通路Wnt1抗体 不同类型抗体的保存指南, 用以避免抗体污染或损伤请不时核查数据表以获取特定保存建议。如果恰当保存和处理, 大多数抗体应能保持活性数月乃至数年。 对于很多抗体而言, 分装成小等份并冻存于 -20℃ 或-80℃ 是*保存条件。分装成小等份可*程度减少由冻融造成的损伤, 以及从单个试剂瓶中多次吸取而引入的污染。小等份只需冻融一次, 如有剩余, 可将剩余物保存于 4℃。在收到抗体时，在 10,000 × g 下离心20 秒以沉积截留于试剂瓶螺纹的溶液, 并以小等份转移至低蛋白结合微量离心管中。小等份的量取决于实验人员在实验中通常采用的量。小等份应不小于10μl；等份越小, 储液浓度因抗体蒸发及吸附于保存瓶表面而受到的影响越大。

公司产品涵盖ELISA研发、PCR试剂盒，细胞培养，各种生化试剂、各种酶类、分子生物学试剂盒、培养基、自产实验室耗材、小型仪器等。此外、上海沪峥还代理了sigma,R&D,ScienCell,ATCC,wak0,omega，Worthington、MBI、Bioworld、Calendon等国外各类*公司的产品。