肠道病毒EV71型(EV-71)试剂盒(荧光-PCR法)为上海沪峥PCR主要产品之一,产品优势 样品种类多,质控严格,高特异性,供货快,已被国内外广大科研工作者使用,被称谓:质量信得过产品
通用名称:肠道病毒EV71型(EV-71)试剂盒(荧光-PCR法)
规格:50T/盒
英文名称:EV-71 Detection Kit (Real-Time PCR Method)
自备试剂:样品 RNA
【检验原理】
本试剂盒对肠道病毒EV71型(EV-71)基因保守区设计特异性的引物和探针[1-3],用荧光 PCR 技术对核酸进行体外扩增检测,从而达到快速检测之目的。
试剂组成】
名 称 |
规 格 |
酶液 |
50μL×1 管 |
EV-71反应液 |
500μL×2 管 |
EV-71阳性质控品 |
50μl ×1 管 |
阴性质控品 |
250μl×1 管 |
【储存条件及有效期】
-20℃避光保存、运输、避免反复冻融,有效期12个月。
【适用仪器】
ABI系列、MJ系列、Roche系列、博日系列及其他荧光定量PCR检测仪。
【保存和运输】
上述标本短期内可保存于-20℃,长期保存可置-70℃,但不能超过6个月,标本运送应采用0℃冰代。
结果判断
阳性:检测通道 Ct 值≤35,且曲线有明显的指数增长曲线;
可疑:检测通道 35值≤38,建议重复检测,如果检测通道仍为 35值≤38, 且曲线有明显的增长曲线,判定为阳性,否则为阴性;
阴性:样本检测结果 Ct 值>38 或无 Ct 值。
质控标准
阴性质控品:Ct 值>38 或无 Ct 值;
阳性质控品:扩增曲线有明显指数生长期,且 Ct 值≤32; 以上条件应同时满足,否则实验视为无效。
肠道病毒EV71型(EV-71)试剂盒(荧光-PCR法)它具有下列特点:1. 即开即用,用户只需要提供样品RNA模板。
2. 引物和探针经过优化,灵敏性高。
3. 提供阳性对照,便于区分假阴性样品。
4. 特异性高,引物是根据马动脉炎病毒高度保守区设计,不会跟其他病毒的RNA发生交叉反应。
5. 本产品足够 50 次 20μL 体系的探针法荧光定量 RT-PCR 反应。
6. 本产品只能用于科研
7..不同批号试剂请勿混合使用,在有效期内使用。
运输及保存: 低温运输,2-8℃保存,保存期限为12个月。
注意事项
:所有试剂使用前需完全解冻,混合均匀,6,000rpm离心数秒后使用。
1. 样本处理(样本处理区)
待检样本的核酸提取可采用病毒RNA提取试剂盒或自动化核酸提取仪等,具体提取方法请参照相关说明书;阳性质控品及阴性质控品无需提取,可直接使用。
2. 扩增试剂准备(PCR前准备区)
取N个(N=阴性质控品+待检样本+阳性质控品)PCR反应管,每管分别加入FMD RT-PCR反应液19μl、RT-PCR酶1 μl (也可根据每头份用量计算N+1份FMD RT-PCR反应液、RT-PCR酶所需总量,两者混匀离心后分装20 μl至单个PCR反应管)。
组分每头份用量FMD RT-PCR反应液19 μlRT-PCR酶。
1 .将所有PCR反应管于6,000rpm离心30s,转移至样本处理区。
2.加样(样本处理区)
3.在上述的PCR反应管中分别加入待检样本RNA提取物、阴性质控品和阳性质控品各5 μl,盖紧管盖,于6,000rpm离心10s,转移至扩增区。