衣原体通用型(CP)试剂盒(荧光-PCR法)
规格:50T/盒
英文名称:CP Detection Kit (Real-Time PCR Method)
【包装规格】50T/盒
自备试剂:样品 RNA
本试剂盒对衣原体通用型(CP)基因保守区设计特异性的引物和探针[1-3],用荧光 PCR 技术对核酸进行体外扩增检测,从而达到快速检测之目的。
试剂组成】
名 称 |
规 格 |
酶液 |
50μL×1 管 |
CP反应液 |
500μL×2 管 |
CP阳性质控品 |
50μl ×1 管 |
阴性质控品 |
250μl×1 管 |
【储存条件及有效期】
-20℃避光保存、运输、避免反复冻融,有效期12个月。
【适用仪器】
ABI系列、MJ系列、Roche系列、博日系列及其他荧光定量PCR检测仪。
【保存和运输】
上述标本短期内可保存于-20℃,长期保存可置-70℃,但不能超过6个月,标本运送应采用0℃冰壶。
结果判断
阳性:检测通道 Ct 值≤35,且曲线有明显的指数增长曲线;
可疑:检测通道 35值≤38,建议重复检测,如果检测通道仍为 35值≤38, 且曲线有明显的增长曲线,判定为阳性,否则为阴性;
阴性:样本检测结果 Ct 值>38 或无 Ct 值。
质控标准
阴性质控品:Ct 值>38 或无 Ct 值;
阳性质控品:扩增曲线有明显指数生长期,且 Ct 值≤32; 以上条件应同时满足,否则实验视为无效。
衣原体通用型(CP)试剂盒(荧光-PCR法)它具有下列特点:
1. 即开即用,用户只需要提供样品RNA模板。
2. 引物和探针经过优化,灵敏性高。
3. 提供阳性对照,便于区分假阴性样品。
4. 特异性高,引物是根据马动脉炎病毒高度保守区设计,不会跟其他病毒的RNA发生交叉反应。
5. 本产品足够 50 次 20μL 体系的探针法荧光定量 RT-PCR 反应。
6. 本产品只能用于科研
7..不同批号试剂请勿混合使用,在有效期内使用。
运输及保存: 低温运输,2-8℃保存,保存期限为12个月。
1. 取 200μL 处理好的样本(不足 200μL,可以加入 PBS 缓冲液或者生理盐水补足 200μL),加入 500μL
裂解液,振荡 30 秒,室温静止 2 分钟。注:针对 难裂解样本,室温静置时间可延长至5 分钟。
2. 把上述混合液转移到吸附柱中(吸附柱要套上收集管,吸取液体时尽量不要吸到悬浮杂质,以免阻塞吸附膜),10000rpm 离心 1 分钟,弃去套管中液体。
3. 向吸附柱中加入 500μL 去蛋白漂洗液,12000rpm 离心 30 秒,弃去套管中液体。
4. 向吸附柱中加入 500μL 洗涤液,12000rpm 离心 30 秒,弃去套管中液体。
5. 向吸附柱中加入 500μL 洗涤液,12000rpm 离心 30 秒,弃去套管中液体。
6. 12000rpm 再次离心 2 分钟。
7. 把吸附柱转移至新的 1.5mL 灭菌离心管中,向吸附柱中加入 50μL 洗脱液,并于室温温育 2 分钟。
8.12000rpm 离心 1 分钟,弃去吸附柱,1.5mL 灭菌离心管中液体即为 DNA/RNA 溶液。提取的 DNA/RNA
可直接用于各种下游应用试验,如不立即使用,请于-80℃保存。