【产品名称】
商品名称:鸭肝炎病毒1型(DHV-1)核酸检测试剂盒(荧光-PCR法)
【包装规格】50 份/盒
【预期用途】
本试剂盒适用于检测的血清或血浆、疑似污染 DHV-1的活病
毒疫苗等标本中禽网状内皮组织增殖病病毒 RNA,适用于禽网状内皮组织增殖病病
毒感染的辅助诊断。其检测结果仅供参考。
鸭肝炎病毒1型(DHV-1)核酸检测试剂盒(荧光-PCR法)【检验原理】
-20℃±5℃,避光保存、运输、反复冻融次数不超过 5 次,有效期 12 个月。
ABI 、安捷伦 MX3000P/3005P、LightCycler、Bio-Rad、Eppendorf 等系列荧光定量 PCR 检测仪。
取 0.5~1mL;疑似污染的食物取 1g
上述标本短期内可保存于-20℃,长期保存可置-70℃,但不能超过 6 个月,标本运送应采用 2~8℃冰袋运输,严禁反复冻融。
1. 样品处理(样本处理区)
1.1 样本前处理
13000rpm 离心 2min,去尽上清;疑似污染的食物用手术剪剪碎混匀后取0.5g 于研磨器中研磨,加入 1.5mL 生理盐水后继续研磨,待匀浆后转至 1.5mL 灭菌离心管中,8000rpm 离心 2min,取上清液 100μL 于 1.5mL 灭菌离心管中;疑似污染的水直接取 100μL
1) DNA 的提取也可以采用DNA 提取试剂盒(离心柱提取法),请严格按照试剂盒说明书进行操作。
本试剂盒用一对禽网状内皮组织增殖病病毒特异性引物,结合一条特异性荧光
探针,用一步法荧光 RT-PCR 技术对禽网状内皮组织增殖病病毒 RNA 进行体外扩
增检测,用于对可疑感染者的病原学诊断。
鸭肝炎病毒1型(DHV-1)核酸检测试剂盒(荧光-PCR法)【试剂组成】
名 称 规 格
酶液 50μl×1 管
REV 反应液 1.0ml×1 管
REV 阳性质控品 50μl ×1 管
阴性质控品 250μl ×1 管
说明:不同批号的试剂盒组分不可交互使用。
鸭肝炎病毒1型(DHV-1)核酸检测试剂盒(荧光-PCR法)结果分析条件设定
设置 Baseline 和 Threshold:一般直接按机器自动分析的结果分析,当曲线出现整体倾斜时,根据分析后图像调节Baseline 的 start 值(一般可在 3~15 范围内调节)、stop 值(一般可在 5~20 范围内调节),以及 Threshold 的 Value 值(上下拖动阈值线至高于阴性对照),重新分析结果。
阳性:检测通道 Ct 值≤35,且曲线有明显的指数增长曲线;
可疑:检测通道 35
阴性:样本检测结果 Ct 值>38 或无 Ct 值。
阴性质控品:Ct 值>38 或无 Ct 值;
阳性质控品:扩增曲线有明显指数生长期,且 Ct 值≤32; 以上条件应同时满足,否则实验视为无效。
? 样本检测结果与样本收集、处理、运送以及保存质量有关;
? 样本提取过程中没有控制好交叉污染,会出现假阳性结果;
? 阳性对照、扩增产物泄漏,会导致假阳性结果;
? 病原体在流行过程中基因突变、重组,会导致假阴性结果;
? 不同的提取方法存在提取效率差异,会导致假阴性结果;
? 试剂运输,保存不当或试剂配制不准确引起的试剂检测效能下降,出现假阴性或定 量检测不准确的结果;
? 本检测结果仅供参考,如须确诊请结合以及其他检测手段。
? 所有操作严格按照说明书进行;
? 试剂盒内各种组分使用前应自然融化,完全混匀并短暂离心;
? 反应液应避光保存;
? 反应中尽量避免气泡存在,管盖需盖紧;
? 使用一次性吸头、一次性手套和各区专用工作服;
? 样本处理、试剂配制、加样需在不同区进行,以免交叉污染;
? 实验完毕后用 10%次氯酸或 75%酒精或紫外灯处理工作台和移液器;
? 试剂盒里所有物品应视为污染物对待,并按照《微生物生物医学实验室生物安全通 则》进行处理。