上海沪峥专业生产销售兰花褐斑病菌PCR试剂盒现货，我公司供应的分子生物学试剂品类齐全，且具有优势价格，欢迎新老客户咨询认购。

产品详细信息

中文名称：兰花褐斑病菌PCR试剂盒

英文名称：Acidovorax avenae ssp. cattleyae

产品规格：50T/盒

用途】用于鲍肌肉萎缩症病毒病毒病的检测、诊断和流行病学调查。

【储存条件及有效期】

-20℃±5℃，避光保存、运输、反复冻融次数不超过5次，有效期12个月。

提示：本品仅用于科研实验，不能用作医疗及临床诊断。

兰花褐斑病菌PCR试剂盒使用方法

1. 样品处理（样本处理区）

1.1 样本前处理

组织样品：每份组织分别从3个不同的位置称取样品约1g，手术剪剪碎混匀后取0.5g于研磨器中研磨，加入1.5mL生理盐水后继续研磨，待匀浆后转至1.5mL灭菌离心管中，8000rpm离心2min，取上清液100μL于1.5mL灭菌离心管中；液体样品，直接取100μL提取

1.2 DNA提取

1) DNA的提取也可以采用（离心柱提取法），请严格按照试剂盒说明书进行操作。

2. 加样（样本处理区）

将步骤1提取的DNA、阳性质控品、阴性质控品各取4μL，分别加入相应的反应管中，盖好管盖，混匀，短暂离心。

3. PCR扩增（核酸扩增区）

4.1 将待检测反应管置于荧光定量PCR仪反应槽内；

4.2 设置好通道、样品信息，反应体系设置为25μL；

荧光通道选择： 检测通道（Reporter Dye）FAM， 淬灭通道（Quencher Dye）NONE，ABI系列仪器请勿选择ROX参比荧光，选择None即可。

4.3 推荐循环参数设置：

4. 结果分析判定

5.1 结果分析条件设定

设置Baseline和Threshold：一般直接按机器自动分析的结果分析，当曲线出现整体倾斜时，根据分析后图像调节Baseline的start值(一般可在3~15范围内调节)、stop值(一般可在5~20范围内调节)，以及Threshold的Value值(上下拖动阈值线至高于阴性对照)，重新分析结果。

5.2 结果判断

阳性：检测通道Ct值≤35，且曲线有明显的指数增长曲线；

可疑：检测通道35<Ct值≤38，建议重复检测，如果检测通道仍为35<Ct值≤38，且曲线有明显的增长曲线，判定为阳性，否则为阴性；

阴性：样本检测结果Ct值>38或无Ct值。

5. 质控标准

阴性质控品：Ct>38或无Ct值显示；

阳性质控品：扩增曲线有明显指数生长期，且Ct值≤32；

以上条件应同时满足，否则实验视为无效。

6. 检测方法的局限性

? 样本检测结果与样本收集、处理、运送以及保存质量有关；

? 样本提取过程中没有控制好交叉污染，会出现假阳性结果；

? 阳性对照、扩增产物泄漏，会导致假阳性结果；

? 病原体在流行过程中基因突变、重组，会导致假阴性结果；

? 不同的提取方法存在提取效率差异，会导致假阴性结果；

? 试剂运输，保存不当或试剂配制不准确引起的试剂检测效能下降，出现假阴性或定量检测不准确的结果；

? 本检测结果仅供参考，如须确诊请结合临床症状以及其他检测手段。

兰花褐斑病菌PCR试剂盒【注意事项】

? 所有操作严格按照说明书进行；

? 试剂盒内各种组分使用前应自然融化，完全混匀并短暂离心；

? 反应液应避光保存；

? 反应中尽量避免气泡存在，管盖需盖紧；

? 使用一次性吸头、一次性手套和各区专用工作服；

? 样本处理、试剂配制、加样需在不同区进行，以免交叉污染；

? 实验完毕后用10%次氯酸或75%酒精或紫外灯处理工作台和移液器；

试剂盒里所有物品应视为污染物对待，并按照《微生物生物医学实验室生物安全通则》进行处理