产品名称:转基因植物NOS基因核酸检测试剂盒(PCR-荧光探针法)
包装:48T
分类:pcr-荧光试剂盒
用途:本产品仅供科研与实验使用,不用于临床诊断等
目的:本试剂盒适用于检测疑似感染者或发病动物等组织、体液或淋巴结等标本中禽流感病毒rna,用于禽流感病毒感染的辅助诊断,其检测结果仅供参考。
转基因植物NOS基因核酸检测试剂盒(PCR-荧光探针法) PCR扩增时在加入一对引物的同时加入一个特异性的荧光探针,该探针为一寡核苷酸,两端分别标记一个报告荧光基团和一个淬灭荧光基团。探针完整时,报告基团发射的荧光信号被淬灭基团吸收;刚开始时, 探针结合在DNA任意一条单链上;PCR扩增时,Taq酶的5’端-3’端外切酶活性将探针酶切降解,使报告荧光基团和淬灭荧光基团分离,从而荧光监测系统可接收到荧光信号,即每扩增一条DNA链,就有一个荧光分子形成,实现了荧光信号的累积与PCR产物形成完全同步。
转基因植物NOS基因核酸检测试剂盒(PCR-荧光探针法) 在PCR 管中加入下列成分:
成份 |
样品 |
阳性对照 |
阴性对照 |
双酶一管式 RT-PCR Buffer, 2× | 15 uL | 15 uL | 15 uL |
EMCV 专一性引物对 | 2 uL | 2 uL | 2 uL |
样品 RNA | 1-5 uL | 无 | 2 uL |
EMCV 阳性对照 | 无 | 2 uL | 无 |
补超纯水到 | 28 uL | 28 uL | 无 |
MMLV-Taq Mix | 2 uL | 2 uL | 2 uL |
[1] 轻柔混匀后上机,按下面参数进行 RT-PCR。
转基因植物NOS基因核酸检测试剂盒(PCR-荧光探针法) 电泳检测RT-PCR 产物。预期的PCR 产物长度为 286 bp。
转基因植物NOS基因核酸检测试剂盒(PCR-荧光探针法) ◆ 注意事项
1.本试剂检测灵敏度高。为了防止污染,实验要分区操作。
1)第一区:样本制备区。
2)第二区:模板添加区。
3)第三区:扩增及产物分析区。
★ 分区之间*进行物理性隔离,避免人为因素造成的污染。
2.实验过程中穿戴工作服和乳胶手套,不同区域独立使用工具,需更换手套和实验服。
3.严格按照操作步骤操作,试剂配制和加样等步骤请严格按照说明书要求在冰盒上操作。
4.反应液中的成分对光敏感,应避光保存。试剂使用前要完全解冻,但应避免反复冻融,推荐使用前离心30秒,并按检测频次将反应液以适当体积分管保存。
5.反应结束后,扩增管请置于密封袋内丢弃,当日清理,开盖易造成气溶胶污染,禁止开盖。
6.不同批号试剂请勿混合使用,在有效期内使用。