产品名称:转基因植物PRSV Rep品系核酸检测试剂盒(PCR-荧光探针法)
检测方法: 实时荧光 PCR
规 格: 50T
保存方式: 2~8℃
有 效 期: 1年
产 地: 中国
用 途: 仅用于科研实验
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ELISA常见问题:转基因植物PRSV Rep品系核酸检测试剂盒(PCR-荧光探针法)
利用ELISA进行检验常见的样本一般包括血液(指血,静脉血),尿,粪便,脑脊液,胸腹水,前列腺液,精液,阴道分泌物等,这些样本收集的时间、方法和保存都有一定的要求。
1、抗原:ELISA抗原有三类:液体中纯化的自然抗原、合成抗原和基因重组抗原。
纯度不高可导致试剂盒的特异性不强,合成抗原一般都是多肽抗原,
试剂盒一般为基因重组抗原。抗原纯度不高,特异性就不强,
2、抗体特异性和亲和力的大小会影响试剂盒的特异性和敏感性
3、酶结合物,试剂盒的保存时间通常由酶的稳定性决定。
最常用的就是辣根过氧化酶-HRP.其他还有碱性磷酸酶和β半乳糖苷酶。
ELISA温浴和洗涤一般为磷酸盐缓冲液(PBS)
碱性磷酸酶的话就不能用PBS洗涤了,因为残留的PBS会抑制一半的酶活性。
TMB显色液取代了OPD为HRP最常用的色原底物。为氧化还原反应(OPD对机体有突变作用,所以改用TMB)
转基因植物PRSV Rep品系核酸检测试剂盒(PCR-荧光探针法)
【参考值(参考范围)】
1.试剂盒有效性判定:
(1)阳性对照:有典型S型扩增曲线或Ct值≤35。
(2)阴性对照:Ct值>38或无Ct值,线形为直线或轻微斜线,无指数增长期。
2.标本结果判定:
(1)阳性:标本检测结果Ct值≤35或有明显指数增长期。
(2)可疑:标本检测结果Ct值在35~38范围内。此时应对标本进行重复检测,如重复实验结果Ct值仍在35~38范围内,有明显指数增长期,则判定为阳性,否则为阴性。
(3)阴性:标本检测结果Ct值>38或无Ct值。
转基因植物PRSV Rep品系核酸检测试剂盒(PCR-荧光探针法)
【检验方法的局限性】
1. 当检测样本中被检核酸浓度低于本试剂盒的*检出限时可能会发生假阴性的结果。
2. 被检样本在采集、运输、储存以及处理过程中操作方式不当容易造成RNA降解而产生假阴性结果。
3. 样本在采集、运输、储存以及处理过程中发生交叉污染,则容易得到假阳性结果。
【产品性能指标】 产品的*检出限为102 Copies/mL,产品CV值≤5%。