产品名称:转基因大豆EPSPS基因核酸检测试剂盒(PCR法)
检测方法: 实时荧光 PCR
规 格: 50T
保存方式: 2~8℃
有 效 期: 1年
产 地: 中国
用 途: 仅用于科研实验
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ELISA常见问题:转基因大豆EPSPS基因核酸检测试剂盒(PCR法)
利用ELISA进行检验常见的样本一般包括血液(指血,静脉血),尿,粪便,脑脊液,胸腹水,前列腺液,精液,阴道分泌物等,这些样本收集的时间、方法和保存都有一定的要求。
1、抗原:ELISA抗原有三类:液体中纯化的自然抗原、合成抗原和基因重组抗原。
纯度不高可导致试剂盒的特异性不强,合成抗原一般都是多肽抗原,
试剂盒一般为基因重组抗原。抗原纯度不高,特异性就不强,
2、抗体特异性和亲和力的大小会影响试剂盒的特异性和敏感性
3、酶结合物,试剂盒的保存时间通常由酶的稳定性决定。
最常用的就是辣根过氧化酶-HRP.其他还有碱性磷酸酶和β半乳糖苷酶。
ELISA温浴和洗涤一般为磷酸盐缓冲液(PBS)
碱性磷酸酶的话就不能用PBS洗涤了,因为残留的PBS会抑制一半的酶活性。
TMB显色液取代了OPD为HRP最常用的色原底物。为氧化还原反应(OPD对机体有突变作用,所以改用TMB)
转基因大豆EPSPS基因核酸检测试剂盒(PCR法)
结果判定
1 结果分析条件设定 阈值设定原则:阈值线设定于刚好超过阴性对照扩增曲线的点。不同仪器可根据仪器噪音
情况进行调整。
2 结果描述及判定
阳性对照 Ct 值≤30 并出现特定的扩增曲线,阴性对照无 Ct 值并且无特定扩增曲线,实验结果成 立;被检样品 Ct 值≤30 并出现特定的扩增曲线为 AIV 阳性;被检样品 30<Ct<37 并出现特定的扩 增曲线,需重新取样提取 RNA,扩增后进行结果判定,如仍是可疑,可判定为阳性;被检样品 Ct 值≥37 时,超过本方法检测灵敏度范围,判定为阴性;对于某些未呈现 S 型曲线,但本底较高的样 品,应为阴性。