按抗体说明书建议的稀释倍数，用 TBST 溶液稀释一抗。如果未取得理想实验结果，则参照一般推荐的稀释倍数上下浮动一个数量级进行一抗稀释进行预试验，然后根据试验结果选择合适稀释倍数，一抗浓度过高会导致产生非特异性条带，过低会导致条带较淡或得不到条带。